miRNA 3′ UTR 克隆

复能基因提供哺乳动物表达载体的人、小鼠、大鼠miRNA 3′ UTR克隆，可用于miRNA靶标验证、预测靶标的功能确证和miRNA对靶标的调控作用的研究。本公司提供两套3’UTR报告载体。在pEZX-MT05载体中，我们将3’UTR序列（来源于公开的基因序列数据库）插入到Gaussia荧光素酶报告基因下游，在哺乳动物细胞中由SV40启动子驱动转录生成Gaussia荧光素酶（Gluc）和3’UTR靶标序列的嵌合mRNA，因此无需裂解细胞实时监测Gluc的表达，研究mRNA-miRNA的相互作用。在相同载体（pEZX-MT05）上带有分泌型碱性磷酸酶（SEAP）报告基因。CMV启动子驱动转录的SEAP作为同质粒内的对照，这种双报告系统可以对多样本常规转染进行精确比较。pEZX-MT06是Firefly/Renilla双荧光素酶报告载体。3’UTR序列在Firefly（hLuc）荧光素酶报告基因下游，CMV启动子驱动转录的Renilla（hRLuc）作为同质粒内的对照。通过裂解细胞检测hLuc和hRLuc的表达。

图1. miRNA 3′ UTR克隆载体骨架

图2. 靶标序列（3′ UTR）表达克隆中miRNA的抑制作用 

已知LIN28基因是miR-125a的靶标。HEK 293细胞转染Lin28 miRNA靶标序列表达克隆（左）或者共转染miR-125a前体miRNA表达克隆（右）。转染24小时后检测GLuc 和内参SEAP活性。仅转染Lin28 miRNA靶标序列表达克隆的细胞中Gluc和SEAP活性之比定为1（左），以此确定共转样本中的比值。如图所示，miR-125a抑制了GLuc-LIN28-3′-UTR克隆中Gluc 70%以上的活性。 

如需订购，请点击跳转商城

Lentiviral clones

? OmicsLink? miRNA 3′ UTR target lentiviral clones

提供超过18,000种人、18,000种小鼠和10,000种大鼠不同载体的预制3’UTR表达克隆，客户也可进行定制。

? OmicsLink? miRNA inhibitor clones

提供客户定制的慢病毒载体miRNA抑制剂表达克隆。

? OmicsLink? miRNA precursor lentiviral clones

提供客户定制的慢病毒载体miRNA前体表达克隆。

? GLuc-ON? promoter-reporter lentiviral clones

提供客户定制的慢病毒载体启动子报告克隆。

? OmicsLink? shRNA lentiviral clones

提供定制慢病毒载体的shRNA表达克隆的服务。

? Genome-CRISP? CRISPR sgRNA lentiviral clones

为客户感兴趣的基因提供sgRNA（single-guide RNA）设计与克隆定制服务。

? OmicsLink? ORF lentiviral clones

提供预制和定制的慢病毒载体的即用型ORF克隆。